Abstract

Hipótesis: La riboflavina, debido al buen rendimiento cuántico de O2(1Δg) podría utilizarse como fotosensibilizador (FS) en terapia fotodinámica (TFD). Objetivos: Analizar la respuesta de células epiteliales a la TFD mediada por riboflavina (RF), estudiando la ultraestructura de las mismas. Identificar las especies reactivas de oxígeno (ERO) involucradas en este mecanismo y determinar el tipo de muerte celular. Materiales y Métodos: Para mejorar la penetración a través de la membrana plasmática, se acetiló la RF obteniendo RF liposoluble (RFL). Con la finalidad de constatar la generación de ERO por ambas RF a longitud de onda (λ) de 460 nm se utilizaron 3-hidroxipiridina y 9-10 dimetilantraceno, drogas que se descomponen en presencia de O2(1Δg). Se verificó el daño celular generado por la acción de ambos FS, RF y RFL activados por luz en células dispersas de tejido hipofisario de ratas. Para comprobar las ERO involucradas se inhibió la citotoxicidad utilizando antioxidantes: catalasa (75 U/ml), superóxido dismutasa (100 U/ml) y L-Histidina (10 mM). Se midió la viabilidad celular con azul de tripán y se analizó la respuesta por microscopía electrónica de transmisión y microscopía fotónica de alta resolución. Resultados: Se demostró que ambas RF iluminadas con el prototipo de lámpara de 10 mW/cm2 y 460 nm de λ, generan ERO que conducen a la muerte celular por dos mecanismos morfológicamente bien diferenciados, necrosis y apoptosis. Conclusión: La citotoxicidad generada por la activación de ambas RF, nos permite sugerir su utilización como FS en la aplicación de TFD.